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生物安全柜标准操作流程

2026-08-17

规范生物安全柜(BSC)的使用、清洁、消毒、维护及应急处置操作,保障实验人员、实验样本及实验环境安全,防止生物气溶胶泄露与交叉污染,确保设备运行合规、实验数据可靠,符合生物安全实验室管理及设备使用相关规范要求。

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一、设备概述与安全要求
岗位职责与使用准备


本规程适用于实验室所有等级Ⅱ级生物安全柜的日常操作、清洁消毒、定期维护、性能核查及报废管理,覆盖所有接触、使用生物安全柜开展微生物检测、细胞培养、样本处理等实验操作的工作人员。Ⅰ、Ⅲ级生物安全柜可参照本流程结合设备说明书适配执行。

岗位职责

生物安全柜

01

操作人员

严格遵守本SOP执行操作,做好设备使用前检查、操作中规范作业、操作后清洁消毒及使用记录填写;熟悉设备风险点及应急处置方法,发现设备异常、故障及时上报,严禁违规、带病操作设备。

02

实验室管理员

负责监督生物安全柜日常使用规范性,定期核查使用记录、清洁消毒记录;统筹设备定期校准、检测、维保工作,建立设备台账,管理设备证书及档案资料,组织操作人员岗前及复训培训。

03

设备维保人员

负责生物安全柜年度性能检测、过滤器更换、故障维修、气密性及气流参数校验,出具合规检测报告,保障设备各项指标符合国标要求。



设备原理


生物安全柜通过洁净单向气流、负压密闭结构及高效过滤器(HEPA)过滤,实现工作区无菌环境,同时阻挡实验产生的生物气溶胶外溢,保护操作人员、实验样本及外部环境,是生物实验核心防护设备。


通用安全准则


仅单人单机操作,特殊双人操作需经实验室风险评估并备案,仅限大尺寸合规柜体使用。

严禁在安全柜内开展明火操作、挥发性有毒化学品、腐蚀性强试剂实验,禁止存放私人物品、杂物及非实验所需器具。

设备必须年度检定合格,在有效期内使用,无合格证书、超期未检、故障报警设备禁止启用。

操作全程保持柜体玻璃门处于额定工作高度,严禁超高开启、完全敞开操作。

手臂进出柜体动作平缓,禁止快速横扫、频繁穿梭气幕,避免破坏层流气流,引发污染风险。


环境与设备检查


检查安全柜周边环境,设备两侧及背部预留≥30cm检修空间,顶部无遮挡、无杂物堆积,实验室通风正常、无扬尘;检查设备电源线、插头、开关完好无损,接地正常,无漏电、线路老化、破损情况;查看设备状态标识,确认处于正常可用、检定合格状态。


柜体清洁消毒


清空柜内所有残留物品、废弃物,清理工作台面碎屑、污渍;采用75%乙醇擦拭工作台面、柜体内壁、玻璃门内侧、操作口边框,擦拭遵循从上到下、从内到外、干净区域到污染区域的顺序;禁止直接向运行风机的柜体喷洒乙醇,防范安全风险;擦拭后自然晾干,避免残留消毒液影响实验。


紫外消毒


关闭玻璃门,开启柜内紫外消毒灯,持续照射30min,对柜体内部环境进行彻底灭菌;消毒结束后关闭紫外灯,禁止紫外灯长时间空开、无人值守照射。

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  • 物品预处理与摆放规划


本次实验所需所有耗材、试剂、样本、器具提前取出,经75%乙醇表面消毒、晾干后统一移入柜内,杜绝实验中途频繁取放物品破坏气流。物品摆放严格分区:无菌耗材、洁净试剂放置于柜体内侧洁净区,待处理样本、污染器具放置于外侧区域,严格区分洁净区与污染区;所有物品远离出风口、回风格栅,与柜体侧壁、过滤器保持≥15cm距离,与玻璃门保持≥10cm距离,不遮挡气流通道。


  • 开机预热


接通电源,开启设备风机及照明系统,空载运行5-10min,待柜内层流气流稳定、气压正常,确认无气流报警、故障提示后,方可开展实验操作。


  • 个人防护准备


操作人员穿戴合规实验服、一次性手套、口罩,必要时佩戴护目镜,手套袖口完全包裹实验服袖口,禁止穿戴宽松衣物、佩戴饰品操作,避免干扰气流或造成污染。





二、操作规范
实验中标准操作流程与收尾



规范进柜操作


平缓将双臂伸入柜体操作区,静止1min适应气流状态,待气流稳定后再开展实验操作;操作过程中肘部、手臂不得倚靠柜体边框、工作台面及格栅,避免破坏负压层流结构。


实验操作规范


所有实验操作尽量在柜体工作区中后部完成,远离操作开口,降低气溶胶外溢风险;严格遵循“洁净操作在前、污染操作在后”原则,减少交叉污染;样本开盖、移液、混匀等易产生气溶胶的操作动作轻柔、缓慢,避免剧烈震荡;柜内物品摆放整齐,不堆积、不混放,废弃耗材、废液及时分类放置于专用收纳容器,不得随意丢弃在工作台面。


过程监控与禁忌


操作全程关注设备运行状态,观察风机、气流、压差指示灯是否正常,有无异响、报警、漏气等异常情况;严禁超量程、超范围使用设备,严禁私自拆卸、改动柜体结构及过滤系统;操作过程中尽量减少手臂进出次数,杜绝大幅度动作扰动气流。


异常暂停处理


若遇设备报警、气流异常、断电等突发情况,立即停止实验,保持玻璃门关闭,静置待气流恢复稳定;出现样本洒落、气溶胶泄露风险时,立即做好个人防护,暂缓操作,启动应急消毒流程。


图片

操作后收尾流程

生物安全柜

01

气溶胶排空

实验操作全部结束后,保持风机持续运行5-10min,彻底排空柜内残留生物气溶胶,消除污染隐患。

02

物品分类移出

无菌耗材、剩余试剂密封后清洁移出,归位存放;实验废液移入含5000mg/L含氯消毒剂的废液缸,浸泡30min后统一处理;实验锐器立即放入专用锐器盒,盛装至3/4时密封更换;污染废弃物密封打包,标注污染标识,按生物废弃物管理规范转运处理。

03

终末清洁消毒

移除所有物品后,再次对柜体内部进行全面消毒:用75%乙醇依次擦拭工作台面、内壁、玻璃门、操作口、支架及边角缝隙,重点擦拭样本接触区域;禁止高浓度含氯消毒剂长期擦拭不锈钢柜体,防止腐蚀设备;消毒后自然晾干,确保柜内无废液、无残留、无污渍。

04

设备关机流程

确认柜内清洁、气溶胶完全排空后,关闭照明系统,保持紫外灯开启30min进行终末灭菌;紫外消毒结束后,关闭紫外灯、风机及总电源,完全关闭玻璃门,保持柜体密闭状态。

05

记录填写

如实填写《生物安全柜使用记录表》,详细记录使用日期、开机/关机时间、使用人、实验内容、设备运行状态、消毒方式及时长、异常情况(如有)等信息,字迹清晰、内容完整,存档备查。






三、日常维护与定期保养
常见异常与应急处置


日常维护


  • 每日使用前检查设备电源、指示灯、气流状态;使用后彻底清洁消毒柜体,保持柜内、设备周边整洁干燥;及时清理台面杂物,杜绝废液残留、物品堆积;每日核对设备状态标识,确认无超期、失效问题。
  • 对设备表面、玻璃门、控制面板进行全面清洁;检查回风格栅有无堵塞、积尘,及时清理除尘;检查紫外灯亮度、使用时长,记录累计使用时间,紫外灯累计使用8000小时或亮度衰减超标时及时更换。
  • 检查设备运行噪音、风机稳定性、压差数值是否正常;核查柜体密封性、玻璃门开合状态;清洁设备散热通道,排查线路老化、松动隐患,发现异常及时上报维保。


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每年委托具备资质的第三方机构开展全面性能检测,检测项目包含气流速度、洁净度、负压、气密性、过滤器完整性、紫外灯强度等,检测合格后获取检定证书,粘贴合格标识;根据使用情况及检测结果,由专业人员更换HEPA高效过滤器、预过滤器,更换后重新检定,合格后方可投入使用。
常见异常与应急处置


设备气流报警、压差异常


立即停止实验,停止手部操作,保持柜门关闭,维持风机运行;排查是否存在物品遮挡格栅、柜门开启过高问题,整改后观察是否恢复;若持续报警,立即关机,悬挂故障标识,上报管理员,禁止继续使用,等待维保检修。


样本、废液洒落污染


立即停止操作,保持风机运行,避免气溶胶扩散;穿戴全套防护用品,用吸水材料覆盖污染区域,喷洒5000mg/L含氯消毒剂,静置浸泡30min;擦拭清理污染物,再次消毒台面及周边区域,全程做好记录,事后上报实验室管理员。


设备异响、漏电、断电


出现异响、异味、漏电提示时,立即断电停机,停用设备并挂牌警示,上报维保人员检修;突发断电时,立即停止实验,保持柜门关闭,来电后空载运行10min,气流稳定、消毒完成后,方可恢复实验操作。


过滤器失效、洁净度不达标


立即停用设备,隔离柜体,禁止开展任何生物实验;联系专业人员更换过滤器并进行全面检定,复检合格后方可重新投入使用,同步更新设备维保档案


过滤器失效、洁净度不达标


立即停用设备,隔离柜体,禁止开展任何生物实验;联系专业人员更换过滤器并进行全面检定,复检合格后方可重新投入使用,同步更新设备维保档案




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生物安全柜标准操作流程

规范生物安全柜(BSC)的使用、清洁、消毒、维护及应急处置操作,保障实验人员、实验样本及实验环境安全,防止生物气溶胶泄露与交叉污染,确保设备运行合规、实验数据可靠,符合生物安全实验室管理及设备使用相关规范要求。

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一、设备概述与安全要求
岗位职责与使用准备


本规程适用于实验室所有等级Ⅱ级生物安全柜的日常操作、清洁消毒、定期维护、性能核查及报废管理,覆盖所有接触、使用生物安全柜开展微生物检测、细胞培养、样本处理等实验操作的工作人员。Ⅰ、Ⅲ级生物安全柜可参照本流程结合设备说明书适配执行。

岗位职责

生物安全柜

01

操作人员

严格遵守本SOP执行操作,做好设备使用前检查、操作中规范作业、操作后清洁消毒及使用记录填写;熟悉设备风险点及应急处置方法,发现设备异常、故障及时上报,严禁违规、带病操作设备。

02

实验室管理员

负责监督生物安全柜日常使用规范性,定期核查使用记录、清洁消毒记录;统筹设备定期校准、检测、维保工作,建立设备台账,管理设备证书及档案资料,组织操作人员岗前及复训培训。

03

设备维保人员

负责生物安全柜年度性能检测、过滤器更换、故障维修、气密性及气流参数校验,出具合规检测报告,保障设备各项指标符合国标要求。



设备原理


生物安全柜通过洁净单向气流、负压密闭结构及高效过滤器(HEPA)过滤,实现工作区无菌环境,同时阻挡实验产生的生物气溶胶外溢,保护操作人员、实验样本及外部环境,是生物实验核心防护设备。


通用安全准则


仅单人单机操作,特殊双人操作需经实验室风险评估并备案,仅限大尺寸合规柜体使用。

严禁在安全柜内开展明火操作、挥发性有毒化学品、腐蚀性强试剂实验,禁止存放私人物品、杂物及非实验所需器具。

设备必须年度检定合格,在有效期内使用,无合格证书、超期未检、故障报警设备禁止启用。

操作全程保持柜体玻璃门处于额定工作高度,严禁超高开启、完全敞开操作。

手臂进出柜体动作平缓,禁止快速横扫、频繁穿梭气幕,避免破坏层流气流,引发污染风险。


环境与设备检查


检查安全柜周边环境,设备两侧及背部预留≥30cm检修空间,顶部无遮挡、无杂物堆积,实验室通风正常、无扬尘;检查设备电源线、插头、开关完好无损,接地正常,无漏电、线路老化、破损情况;查看设备状态标识,确认处于正常可用、检定合格状态。


柜体清洁消毒


清空柜内所有残留物品、废弃物,清理工作台面碎屑、污渍;采用75%乙醇擦拭工作台面、柜体内壁、玻璃门内侧、操作口边框,擦拭遵循从上到下、从内到外、干净区域到污染区域的顺序;禁止直接向运行风机的柜体喷洒乙醇,防范安全风险;擦拭后自然晾干,避免残留消毒液影响实验。


紫外消毒


关闭玻璃门,开启柜内紫外消毒灯,持续照射30min,对柜体内部环境进行彻底灭菌;消毒结束后关闭紫外灯,禁止紫外灯长时间空开、无人值守照射。

图片


  • 物品预处理与摆放规划


本次实验所需所有耗材、试剂、样本、器具提前取出,经75%乙醇表面消毒、晾干后统一移入柜内,杜绝实验中途频繁取放物品破坏气流。物品摆放严格分区:无菌耗材、洁净试剂放置于柜体内侧洁净区,待处理样本、污染器具放置于外侧区域,严格区分洁净区与污染区;所有物品远离出风口、回风格栅,与柜体侧壁、过滤器保持≥15cm距离,与玻璃门保持≥10cm距离,不遮挡气流通道。


  • 开机预热


接通电源,开启设备风机及照明系统,空载运行5-10min,待柜内层流气流稳定、气压正常,确认无气流报警、故障提示后,方可开展实验操作。


  • 个人防护准备


操作人员穿戴合规实验服、一次性手套、口罩,必要时佩戴护目镜,手套袖口完全包裹实验服袖口,禁止穿戴宽松衣物、佩戴饰品操作,避免干扰气流或造成污染。





二、操作规范
实验中标准操作流程与收尾



规范进柜操作


平缓将双臂伸入柜体操作区,静止1min适应气流状态,待气流稳定后再开展实验操作;操作过程中肘部、手臂不得倚靠柜体边框、工作台面及格栅,避免破坏负压层流结构。


实验操作规范


所有实验操作尽量在柜体工作区中后部完成,远离操作开口,降低气溶胶外溢风险;严格遵循“洁净操作在前、污染操作在后”原则,减少交叉污染;样本开盖、移液、混匀等易产生气溶胶的操作动作轻柔、缓慢,避免剧烈震荡;柜内物品摆放整齐,不堆积、不混放,废弃耗材、废液及时分类放置于专用收纳容器,不得随意丢弃在工作台面。


过程监控与禁忌


操作全程关注设备运行状态,观察风机、气流、压差指示灯是否正常,有无异响、报警、漏气等异常情况;严禁超量程、超范围使用设备,严禁私自拆卸、改动柜体结构及过滤系统;操作过程中尽量减少手臂进出次数,杜绝大幅度动作扰动气流。


异常暂停处理


若遇设备报警、气流异常、断电等突发情况,立即停止实验,保持玻璃门关闭,静置待气流恢复稳定;出现样本洒落、气溶胶泄露风险时,立即做好个人防护,暂缓操作,启动应急消毒流程。


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操作后收尾流程

生物安全柜

01

气溶胶排空

实验操作全部结束后,保持风机持续运行5-10min,彻底排空柜内残留生物气溶胶,消除污染隐患。

02

物品分类移出

无菌耗材、剩余试剂密封后清洁移出,归位存放;实验废液移入含5000mg/L含氯消毒剂的废液缸,浸泡30min后统一处理;实验锐器立即放入专用锐器盒,盛装至3/4时密封更换;污染废弃物密封打包,标注污染标识,按生物废弃物管理规范转运处理。

03

终末清洁消毒

移除所有物品后,再次对柜体内部进行全面消毒:用75%乙醇依次擦拭工作台面、内壁、玻璃门、操作口、支架及边角缝隙,重点擦拭样本接触区域;禁止高浓度含氯消毒剂长期擦拭不锈钢柜体,防止腐蚀设备;消毒后自然晾干,确保柜内无废液、无残留、无污渍。

04

设备关机流程

确认柜内清洁、气溶胶完全排空后,关闭照明系统,保持紫外灯开启30min进行终末灭菌;紫外消毒结束后,关闭紫外灯、风机及总电源,完全关闭玻璃门,保持柜体密闭状态。

05

记录填写

如实填写《生物安全柜使用记录表》,详细记录使用日期、开机/关机时间、使用人、实验内容、设备运行状态、消毒方式及时长、异常情况(如有)等信息,字迹清晰、内容完整,存档备查。






三、日常维护与定期保养
常见异常与应急处置


日常维护


  • 每日使用前检查设备电源、指示灯、气流状态;使用后彻底清洁消毒柜体,保持柜内、设备周边整洁干燥;及时清理台面杂物,杜绝废液残留、物品堆积;每日核对设备状态标识,确认无超期、失效问题。
  • 对设备表面、玻璃门、控制面板进行全面清洁;检查回风格栅有无堵塞、积尘,及时清理除尘;检查紫外灯亮度、使用时长,记录累计使用时间,紫外灯累计使用8000小时或亮度衰减超标时及时更换。
  • 检查设备运行噪音、风机稳定性、压差数值是否正常;核查柜体密封性、玻璃门开合状态;清洁设备散热通道,排查线路老化、松动隐患,发现异常及时上报维保。


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每年委托具备资质的第三方机构开展全面性能检测,检测项目包含气流速度、洁净度、负压、气密性、过滤器完整性、紫外灯强度等,检测合格后获取检定证书,粘贴合格标识;根据使用情况及检测结果,由专业人员更换HEPA高效过滤器、预过滤器,更换后重新检定,合格后方可投入使用。
常见异常与应急处置


设备气流报警、压差异常


立即停止实验,停止手部操作,保持柜门关闭,维持风机运行;排查是否存在物品遮挡格栅、柜门开启过高问题,整改后观察是否恢复;若持续报警,立即关机,悬挂故障标识,上报管理员,禁止继续使用,等待维保检修。


样本、废液洒落污染


立即停止操作,保持风机运行,避免气溶胶扩散;穿戴全套防护用品,用吸水材料覆盖污染区域,喷洒5000mg/L含氯消毒剂,静置浸泡30min;擦拭清理污染物,再次消毒台面及周边区域,全程做好记录,事后上报实验室管理员。


设备异响、漏电、断电


出现异响、异味、漏电提示时,立即断电停机,停用设备并挂牌警示,上报维保人员检修;突发断电时,立即停止实验,保持柜门关闭,来电后空载运行10min,气流稳定、消毒完成后,方可恢复实验操作。


过滤器失效、洁净度不达标


立即停用设备,隔离柜体,禁止开展任何生物实验;联系专业人员更换过滤器并进行全面检定,复检合格后方可重新投入使用,同步更新设备维保档案


过滤器失效、洁净度不达标


立即停用设备,隔离柜体,禁止开展任何生物实验;联系专业人员更换过滤器并进行全面检定,复检合格后方可重新投入使用,同步更新设备维保档案




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